ماجرای فیلم ادامه قسمت اول (Night at the Museum 2006) است که حول و هوش اتفاقاتی است که در موزه اسمیتسونیان واشنگتن رخ میدهد .(بن استیلر) که بعد ازاتفاقات داستان اول از شهر خارج شده بعد از گذشت چند وقت به شهر بر میگرده و متوجه میشه که موزه قبلی تعطیل شده و تمام اشیاء عتیقه این موزه به موزه جدیدی در واشنگتن انتقال پیدا کرده . شخصیتهای جدید این قسمت ماجراهای جالب و خنده داری رو رقم میزنن که هر بیننده ای رو به خودش جلب میکنه …

چند دانش آموز تصمیم می گیرند برای اینکه از دست قلدرهای کلاس های بالاتر در امان باشند یک سرباز کهنه کار به نام «دریلبیت تایلور»، که بی خانمان است، را استخدام کنند تا از آنها محافظت کند.

سه برادر آمریکایی که یک سال است با هم صحبت نکرده اند، تصمیم می گیرند با هم با قطار به سراسر هند سفر کنند، تا دوباره پیوند برادری شان را مثل گذشته محکم سازند. اما...

مولی و کارل زوج جوان و خوشبختی هستند که بتازگی با هم ازدواج کرده اند و پس از ماه عسل به خانه شان باز می گردند. کارل پس از بازگشت بلافاصله متوجه می شود یکی از دوستان صمیمی اش به اسم رندی دوپری اخیراً شغل، خانه و اتومبیل اش را از دست داده است. کارل بدون اینکه با مولی مشورت کند به رندی پیشنهاد می دهد که موقتاً در خانه آنها اقامت کند...

«لری دیلی» (استیلر) کاری را به عنوان نگهبان شب موزه ی تاریخ طبیعی قبول می کند اما در نخستین شب نگهبانی اش در می یابد که چه کار مشکلی دارد: شب که فرا می رسد یک طلسم مصری، اشیا و فیگورهای مومی را زنده می کند!....

لایتینگ مک کوئین ماشین مسابقه ای خوش عکس همیشه برای پیروز شدن مسابقه می دهد. مک کوئین در راه رسیدن به محل مسابقات قهرمانی جام پیستون در کالیفرنیا برای مسابقه دادن با دو رقیب دیرینه، به طور غیر منتظره خود را در جاده 66 شهر رادیاتور اسپرینگ مییابد و با شخصیتهای این شهر آشنا می شود و می فهمد که زندگی همانند یک سفر است نه خط پایان ...

لوک ویلسون در نقش یک همسر سابق خوش قلب بازی می کند که در یک هتل بازنشستگی کار می کند. سه دوست سالخورده به او کمک می کنند تا نامزد خود را بدست آورد زیرا در مبارزه با فساد هتل به آنها کمک می کند...

حال (گرگ فوکر) ، وارد حلقه اعتماد خانواده نامزدش پم شده است . زمان ازدواج آنها نزدیک است و از سوی دیگر پم به اعضای خانواده اش خبر می دهد که حامله است . با توجه به این شرایط جک و دینا ، والدین سنتی و محافظه کار پم تصمیم می گیرند تا با والدین بی خیال داماد آینده شان ملاقات کنند ....

لندن، اواخر قرن نوزدهم ، مخترعی نابغه به نام «فیلئاس فاگ» شرط می بندد که می تواند دنیا را در هشتاد روز دور بزند. در این سفر ، جوانی چینی به نام «لو شینگ» نیز که به خدمت «فاگ» درآمده، او را همراهی می کند.

اقیانوس شناسی بنام «استیو زیسو» تصمیم می‌گیرد از کوسه‌ای افسانه ای که دوستش را کشته است، انتقام بگیرد. از این رو خدمه ای را جمع می‌کند و…